在對瘦和肥胖小鼠的附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT） 進(jìn)行表達(dá)芯片分析時，spp1（分泌的磷蛋白 1 或骨橋蛋白，OPN）是飼喂高脂飲食 （HFD） 12 周的小鼠中上調(diào)最高的基因（~28 倍）。OPN 增加介導(dǎo) ATM 向 eWAT15 的募集。OPN 主要由成骨細(xì)胞和骨細(xì)胞分泌，是骨骼細(xì)胞外基質(zhì)中豐富的非膠原磷蛋白。它用于調(diào)節(jié)基質(zhì)礦化和骨細(xì)胞（骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞）附著。OPN 高度集中在骨水泥線上，其中殘留和新形成的骨在骨細(xì)胞和底層破骨細(xì)胞周圍的限制層結(jié)構(gòu)（細(xì)胞-基質(zhì)相互作用）的骨表面整合（礦物-基質(zhì)相互作用）。

在高脂飲食 （high-fat diet：HFD） 誘導(dǎo)的肥胖中，附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT） 分泌一系列細(xì)胞因子來調(diào)節(jié)器官和組織的代謝，但其對骨代謝的影響尚不清楚。在這里，我們報道了 eWAT 中的巨噬細(xì)胞是骨橋蛋白的主要來源，骨橋蛋白選擇性地循環(huán)到骨髓并通過激活破骨細(xì)胞來促進(jìn)骨基質(zhì)的降解，以及調(diào)節(jié)骨髓衍生的巨噬細(xì)胞 （BMDM） 以吞噬小鼠骨髓中脂肪細(xì)胞釋放的脂滴。然而，骨橋蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)的乳酸積累通過限制溶酶體中 ATP6V0d2 的能量再生來阻斷 BMDMs 中的脂肪分解和破骨細(xì)胞生成。手術(shù)切除 eWAT 和局部注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體 （用于清除巨噬細(xì)胞） 或骨橋蛋白中和抗體均顯示出對 HFD 誘導(dǎo)的小鼠骨質(zhì)流失的改善。這些結(jié)果為開發(fā)緩解肥胖相關(guān)骨骼疾病的治療策略提供了一條途徑。

研究背景：分別選取高脂飲食組 (HFD)和正常飲食組（NFD）的小鼠附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT）。巨噬細(xì)胞是eWAT中的主要免疫細(xì)胞，基于基因表達(dá)，巨噬細(xì)胞可進(jìn)一步分為：血管周樣巨噬細(xì)胞(C1, PVM)，非血管周樣巨噬細(xì)胞(C3, NPVM)，脂質(zhì)相關(guān)巨噬細(xì)胞(LAM, C2)，proliferative LAM (C5, P-LAM)，膠原表達(dá)巨噬細(xì)胞(C4, CEM)和調(diào)節(jié)性巨噬細(xì)胞(C6, RM)。與對照組相比，高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖導(dǎo)致LAMs和P-LAMs數(shù)量急劇增加，NPVMs和PVMs數(shù)量顯著降低。荷蘭liposoma巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes經(jīng)過全球客戶的大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，塔尖客戶的選擇，頂刊Cell，Nature和Science的發(fā)表，正所謂Proven and published^®。附睪白色脂肪組織 （eWAT）巨噬細(xì)胞在模型中的增多，同時骨橋蛋白的共定位，表達(dá)增加，骨質(zhì)情況的變化三者的關(guān)系研究期待躍然紙上。附睪白色脂肪組織 （eWAT）巨噬細(xì)胞在高脂誘導(dǎo)肥胖模型氯膦酸二鈉脂質(zhì)體清除解決方案，使用荷蘭Liposoma巨噬細(xì)胞清除劑：Clodronnate Liposomes氯膦酸二鈉脂質(zhì)體（CP-005-005）來清除巨噬細(xì)胞。論文信息和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。

論文信息：

論文題目：Macrophages in epididymal adipose tissue secrete osteopontin to regulate bone homeostasis

期刊名稱：Nature Communications

時間期卷：13, Article number: 427 (2022)

在線時間：2022年1月20日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-021-27683-w

產(chǎn)品信息：

貨號：CP-005-005

規(guī)格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

辦事處：Target Technology（靶點(diǎn)科技）

氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除附睪脂肪組織中的巨噬細(xì)胞，其分泌骨橋蛋白以調(diào)節(jié)骨穩(wěn)態(tài)。氯膦酸鹽二鈉脂質(zhì)體清除巨噬細(xì)胞在高脂誘導(dǎo)的肥胖（HFD）模型附睪脂肪組織和破骨細(xì)胞功能研究，荷蘭Liposoma巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：

F4/80+ and CD11b+ macrophages in eWAT secrete OPN

Obesity induces macrophages to infiltrate the CLSs of eWAT, and the presence of these ATMs is closely correlated with lipid turnover and chronic systemic inflammation. It was unknown whether inhibition of these actions by depleting ATMs would be able to restore bone marrow homeostasis. After injection of clodronate liposomes (CL, 0.675?mg/unilateral/3 days, to clear the ATMs) into the bilateral eWAT for 8 weeks, infiltration of ATMs was significantly lower in the HFD-fed mice (HFD?+?CL) than the HFD-fed mice treated with control liposomes (HFD?+?Ctrl) (Fig. 4a, b). The progression of bone loss was attenuated, and rBMAT mass significantly decreased in the HFD?+?CL group compared with the HFD?+?Ctrl group (Fig. 4c–e). Together, these results suggest that obesity activates the ATMs of eWAT to influence bone marrow metabolism.

ATM(adipose tissue-derived macrophages： ATMs)depletion

The abdominal hair was shaved, and the skin was treated with betadine. ATMs were depleted by injecting clodronate liposomes (0.675?mg/unilateral/3 days, LIPOSOMA, Lot # C10E0218) into the bilateral eWAT under inhalation isoflurane without surgical incision every 3 days from 12 weeks of age. Mice were simultaneously fed an NFD or HFD for 8 weeks. The control group mice received the control liposome (LIPOSOMA, Lot# C14E0218).

注射方式：局部注射，注射到雙側(cè)附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT）

注射頻頻：3天一次

注射劑量：0.675mg。clodronate Liposomes試劑濃度是5mg/ml。也是單側(cè)注射135ul。